枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是在工业发酵和微生物分子遗传学领域具有重要价值的革兰氏阳性菌[1-2]，目前利用能独立复制的质粒对该菌进行遗传改造，是构建枯草芽孢杆菌基因工程菌的重要方式。然而，因质粒稳定性差和表达调控元件启动子的强度低等限制因素，导致现有的枯草芽孢杆菌遗传操作系统并不完善[3-6]。枯草芽孢杆菌麦芽糖操纵元件启动子(glv)调控麦芽糖操纵元件基因glvA(编码6-磷酸-α-葡萄糖苷酶)、glvR(编码调节蛋白GLVR)和glvC(编码转运蛋白GLVC)的表达[7-9]。其中，GLVC是磷酸烯酮式丙酮酸糖类磷酸转移酶系统(PTS)的组分，参与麦芽糖的转运及磷酸化；GLVR和6-磷酸麦芽糖结合可以促进glv启动子的转录；而葡萄糖通过代谢产物阻遏位点(cre)能反馈抑制glv启动子[10-14]。glv启动子是一个诱导型的可控启动子，其诱导成本低，具有较好的应用前景。本试验选择在枯草芽孢杆菌中遗传稳定性较好的载体，以cre位点突变的glv启动子为调控元件构建表达载体，通过同源重组改造枯草芽孢杆菌宿主菌，缓解葡萄糖对目标基因表达的抑制，旨在获得枯草芽孢杆菌的高效表达系统，为重组枯草芽孢杆菌的研究与应用奠定基础。